DARPin

DARPins er genetisk manipulerede antistof mimetiske proteiner typisk udviser meget specifikke og høj affinitet målprotein-binding. De stammer fra naturlige ankyrin proteiner og består af mindst tre, som regel fire eller fem gentagne motiver af disse proteiner. Deres molekylvægt er ca. 14 eller 18 kDa for fire eller fem gentagne DARPins hhv.

DARPins bruges som testpræparater værktøjer, og diagnostiske og terapeutiske anvendelser bliver rettet mod. I 2010, det første af disse molekyler, kodenavnet MP0112, trådte kliniske forsøg.

Oprindelse, struktur og generering

DARPins er udviklet primært på universitetet i Zürich, Schweiz. De er afledt af naturligt forekommende proteiner, ankyrin et protein klasse, der er mediere høj affinitet protein-protein interaktioner i naturen. Sekvensopstillinger af flere tusinde naturlig ankyrin gentagne motiver kombineret med struktur baseret design og rekombinant DNA-fremgangsmåder anvendes til produktion af disse proteiner. DARPins er sammensat af gentagne strukturenheder, der danner et stabilt protein-domæne med en stor potentiel interaktion måloverflade. Typisk er DARPins består af fire eller fem gentagelser, svarende til den gennemsnitlige størrelse af naturlige ankyrin repeat proteindomæner. Proteiner med mindre end tre gentagelser ikke danner en tertiær struktur. Molekylmassen afhængigt af antallet af gentagelser er som følger:

Biblioteker af DARPins med randomiserede potentielle interaktion mål rester med mangfoldighed på over 10 varianter er blevet genereret på DNA-niveau. Fra disse biblioteker, DARPins bindende mål for valg med picomolær affinitet og specificitet kan vælges ved hjælp ribosomvisning eller signal anerkendelse partikel fagdisplay. DARPins kan designes til at fungere som receptoragonister, antagonister, inverse agonister, enzyminhibitorer, eller simple target protein bindemidler.

Egenskaber

DARPins udtrykkes i cytoplasmaet af Escherichia coli i høje niveauer i opløselig form. Proteinerne udviser høj termisk og termodynamisk stabilitet, som er stigende med stigende gentagelse nummer. DARPins er stabile i menneskeblod serum og indeholder ikke T-celle-epitoper. Den høje specificitet og affinitet for binding DARPins er blevet tilskrevet stift legeme bindende tilstand. Multi-specifikke eller multi-valente konstruktioner lavet af genetisk fusion viser lignende egenskaber som enkelt domæne DARPins. Fraværet af cysteiner i stilladset muliggør konstruktion af stedspecifikke cysteiner, så steddirigeret kobling af kemikalier til molekylet.

Ansøgninger og klinisk udvikling

DARPins er blevet anvendt som forskningsværktøjer, som diagnostiske midler og som terapeutiske midler. Zürich baserede Molekylær Partners AG er i øjeblikket forfølger udviklingen af ​​terapeutiske DARPins. MP0112, den første terapeutiske DARPin kandidat, er en vaskulær endotel vækstfaktor inhibitor og er trådt kliniske forsøg til behandling af våd makuladegeneration og diabetisk makulært ødem i begyndelsen af ​​2010.

  0   0
Forrige artikel Académico de Viseu FC

Kommentarer - 0

Ingen kommentar

Tilføj en kommentar

smile smile smile smile smile smile smile smile
smile smile smile smile smile smile smile smile
smile smile smile smile smile smile smile smile
smile smile smile smile
Tegn tilbage: 3000
captcha